基于MS2衣壳蛋白系统的活细胞内JunmRNA定位初探

作者： 黄静 [1,2] ; 李凤磊 [2] ; 万传璐 [2] ; 张彦 [2] ; 曹诚 [2] ; 张部昌 [1] ; 赵志虎 [2]

摘要：目的检测细胞中JunmRNA在活细胞内的定位。方法设计引物，构建融合MS2茎环结构串联重复的Jun表达载体（pcDNA3．1-Jun-MS2-48X）。转染细胞后，绿色荧光蛋白（GFP）-MS2融合蛋白可与MS2茎环串联重复结构结合，通过荧光显微镜观察GFP的细胞定位，能够间接确定JunmRNA在细胞内的定位。结果成功构建了pcDNA3．1-Jun-MS2-48X表达载体，经荧光显微镜观察，能够看到明显的绿色荧光，并且在细胞内聚集。结论实现了在细胞内实时观察JunmRNA，为在单细胞水平上JunmRNA的定位提供了新的技术方法。

关键字： GFP—MS2融合蛋白    mRNA胞内定位    RNA-蛋白相互作用    Jum      

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