一种高保真单向DNA合成方法初步探索

作者：吴逊 [1,2] ; 李玉霞 [1] ; 李北平 [1] ; 李炳娟 [1] ; 白东梅 [1] ; 张昕 [2] ; 凌焱 [1] ; 周围 [1] ; 刘刚 [1] ; 陈惠鹏 [1]

摘要：目的建立一种高保真、简单快速的DNA片段合成方法。方法提出一种高保真DNA单向合成方法（high fidelity DNA unidirection synthesis method,HFUS）,主要在Phusion DNA聚合酶、BsrDⅠ限制性内切酶和λ外切酶3种酶协同作用下,将一条正向DNA单链和数条反向DNA单链通过逐个顺序扩增的方式,最终合成出目的DNA片段。该方法采用37℃、50℃和72℃3个温度的快速转换实现片段扩增的分步有序化合成。结果通过HFUS法,初步合成出2条长度分别为340 bp、450 bp的DNA随机序列片段。结论该研究探索了一种新的合成DNA片段的方法,初步实现了长达450 bp DNA片段的快速合成,为DNA合成方法提供了新的思路。

关键字： DNA片段合成单向延伸高保真DNA单向合成法

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