副溶血弧菌VPA1405多克隆抗体制备及应用

作者：闫小娟 [1] ; 张义全 [2] ; 王丽 [1] ; 刘梦颖 [1] ; 杨世亚 [1] ; 杨瑞馥 [2] ; 周冬生 [2] ; 邱景富 [1]

摘要：目的建立副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus，VP）的Western印迹方法。方法将VPAl405基因克隆到pET-28a（＋）载体，转入大肠杆菌BL21中进行不可溶性表达，在变性条件下纯化得到VPA1405蛋白，制备的包涵体溶液直接免疫兔得到多克隆抗体，进而利用Western印迹检测VPAl405蛋白在野生株（wT）和opaR基因敲除株（AopaR）中表达水平的差异。结果成功表达纯化了6个与生物膜相关基因的蛋白；Western印迹结果显示OpaR调控子对VPAl405基因的表达呈正调控，这与表型实验结果相符。结论成功建立了VP的Western印迹实验平台，该平台可用于后续VP生物膜相关基因的调控研究。

关键字：副溶血弧菌生物膜 Western印迹

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