VEGF启动子活性的测定

作者：刘婕 [1] ; 林娅红 [1,2] ; 张亚楠 [1] ; 丁丽华 [1] ; 叶棋浓 [1]

摘要：目的构建含有VEGF基因的不同片段启动子的荧光素酶报告基因载体,并检测VEGF启动子不同片段的活性。方法用PCR扩增出VEGF启动子的不同片段,插入到荧光素酶报告基因载体pGL4-basic中,确定所扩增的DNA序列后,将其转染至293T细胞中,检测其不同片段的活性。结果测序结果表明,扩增的不同片段的VEGF启动子序列正确;荧光素酶活性实验表明,VEGF启动子＋72～-128 bp至＋72～-528 bp片段具有较高的活性。结论构建了VEGF启动子5＇端缺失不同片段突变体报告基因表达载体,为VEGF转录因子的筛选及功能研究提供了重要基础。

关键字： VEGF启动子荧光素酶报告基因转录活性

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