期刊简介
酶解法清除猪皮α-Gal抗原的研究
作者： 贠志敏 ; 李素波 ; 张雪 ; 檀英霞 ; 季守平 ; 高红伟 ; 宫锋
摘要：目的利用脆弱拟杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶清除猪皮细胞及基质的异种抗原（α-Gal抗原）,降低猪皮基质敷料的免疫原性。方法 2月龄健康无皮肤疾患的猪皮皮片,经剖层裁切成不同的规格后,分别经碘酊和75%乙醇溶液浸泡消毒,随后用PBS清洗后进行酶解条件的摸索;采用免疫荧光法检测猪皮的α-Gal抗原,双抗夹心ELISA法检测残留酶,通过对酶解猪皮的残留酶和α-Gal抗原的检测进而优化、改进酶解条件和洗涤条件,以确立最佳酶解工艺。结果建立了有效的酶解方法和洗涤方法,酶解后猪皮的α-Gal抗原清除率〉90%,残留酶不能检出（间接ELISA法检测微量α-半乳糖苷酶的下限为1 ng/ml）。结论所建立的酶解工艺和洗涤工艺可有效清除猪皮细胞及基质的α-Gal抗原,建立了制备低免疫原性猪皮敷料的方法。
关键字： 猪皮 免疫原性 α-半乳糖苷酶 α-Gal抗原 残留酶